Optimización del control interno de la calidad de RT-PCR en tiempo real para detección cualitativa de SARS-CoV-2
La detección molecular del SARS-Cov-2, es fundamental para el diagnostico y control de la pandemia., que se ocupo la RT-CPR en tiempo real es la prueba molecular estándar. Se utilizan muestras biológicas respiratorias, como Hisopados nasofaríngeos y orofaríngeos para diagnosticar infección especialmente en los primero días de síntomas o tras contacto con casos positivos
La extracción del ácido nucleico viral, generalmente ARN viral, se realiza mediante kits especializados para garantizar la pureza y la calidad del material. Que se usan controles negativos específicos para detectar inhibición o errores en la extracción
La técnica empelada es la RT-PCR (tiempo real) permite amplificar genes específicos del virus en especial el gen N y el ORF1ab- (FTD-SARS-CoV-2 de Siemens) transformando el ARN viral en ADN complementario
El resultado obtenido son Cualitativos, indicando la presencia o ausencia del virus en la muestra, pero los valores de umbral del ciclo (Cq) puede aportar información semicuantitativa sobre la carga viral ( debido a su alta sensibilidad y especificidad )
Pasos para realizar el RT-PCR
- Toma de muestra: Recolección
- Alicuotado: Preparación y distribución
- Extracción de ARN viral: Aislamiento
- Preparación del master mix: Mezcla
- Amplificación del material genético
- Lectura e interpretación del resultado: Obtención del resultado
- Entrega del resultado: Resultado final
Referencias Bibliográficas
- Torres-Gamarra G, Torres-Gamarra G. Optimización del control
interno de calidad de RT-PCR en tiempo real para detección cualitativa de
SARS-CoV-2. Revista del Cuerpo Médico Hospital Nacional Almanzor Aguinaga
Asenjo [Internet]. 2023 [cited
2025 Jun 7];16(1):71–7. Available from: http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2227-47312023000100009
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